养细胞真是一件特别心累的事，不知不觉间可能就会出现很多问题，细胞不长了、不贴壁了......

实在让人操碎了心。

培养细胞生长缓慢

可能原因

1.由于更换不同培养液或血清；

2.培养液中一些细胞生长必须成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏；

3.培养物中有少量细菌或真菌污染；

4.试剂保存不当；

5.接种细胞起始浓度太低；

6.细胞已老化；

7.支原体污染。

解决方法

1.比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验，让细胞逐渐适应新培养液；

2.换入新鲜配置培养液，或补加谷氨酰胺及生长因子；

3.用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物；

4.血清需保存在-20℃。培养液需在2-8℃避光保存。含血清完全培养液在2-8℃保存，需在1周内用完；

5.增加接种细胞起始浓度；

6.换用新的保种细胞；

7.分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

北京缔一生物科技有限公司 国内总代理的 Ausbian 品牌

Ausbian特级胎牛血清 Ausbian Fetal Bovine Serum，Sterile

Ausbian澳洲进口特级胎牛血清在细胞培养中的作用：

1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2.提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调节它们所结合的物质活力。

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5.起酸碱度缓冲液作用。

6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

7.参与细胞冻存。

在细胞培养中，胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%～20%（最常见为10%）的。具体到不同试验，应依据文献报导，或细胞类型或基础培养基的成分来确定适宜浓度。胎牛血清应在-20℃储存，运输应干冰冷链运输，避免反复冻融，确保血清中因子活性不受影响，保证血清优良品质。

孙子兵法